PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Ribeiro Júnior J.C., Teider Junior P.I., Oliveira A.L.M., Rios E.A., Tamanini R. & Beloti V. 2018. Proteolytic and lipolytic potential of Pseudomonas spp. from goat and bovine raw milk. [Potencial proteolítico e lipolítico de espécies de Pseudomonas do leite cru caprino e bovino.] PesquisaVeterinária Brasileira 38(8):1577-1583. Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia para a Cadeia Produtiva do Leite, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Estadual de Londrina, Cx. Postal 11.011, Londrina, PR 86 057-970, Brazil. E-mail: ribeirojuniorjc@gmail.com Pseudomonas, the main genus of gram-negative microorganisms isolated from milk, is psychrotrophic, biofilm-forming, and thermo-resistant deteriorating enzyme producers. The aim of this study was to quantify Pseudomonas spp. in goat’s and cow’s milk produced in the Paraná state, Brazil, to evaluate the deteriorating activity of the isolates at mesophilic and psychrotrophic conditions and to identify, at the species level, the isolates with alkaline metalloprotease (aprX gene) production potential. Microbiological, biochemical and molecular methods were used for isolating, confirming and identifying of isolates. The mean counts were 1.6 (±6.3)x104 and 0.89(±3)x102 CFU/mL for goat and bovine milk samples, respectively, immediately after milking. Of the Pseudomonas colonies isolated from goat milk (n=60), 91.7% showed proteolytic potential when incubated at 35°C/48 h and 80% at 7°C/10 days, and lipolytic potential was observed in 95% of the isolates incubated in mesophilic and 78.3% at refrigeration conditions. From the isolates of bovine milk (n=20), 35% showed proteolytic activity only when incubated at 35°C/48 h, and lipolytic potential was observed in 25% of the isolates incubated at 7°C/10d and 35°C/48h. It was observed that 83.3% and 25% of the isolates genetically confirmed as Pseudomonas spp. of goat and bovine milk showed the potential for alkaline metalloprotease production, with the species P. azotoformans, P. koreensis, P. gessardii, P. monteilii and P. lurida being the most frequent in goat milk and P. aeruginosa the only species identified in cow milk.

• Proteolytic lipolytic Pseudomonas spp. goat bovine milk alkaline metalloprotease microbial diversity psychrotrophic spoilage bacterioses Proteolítico lipolítico leite caprinos bovinos deteriorantes diversidade microbiana metaloprotease alcalina psicrotróficos.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Ribeiro Júnior J.C., Teider Junior P.I., Oliveira A.L.M., Rios E.A., Tamanini R. & Beloti V. 2018. Proteolytic and lipolytic potential of Pseudomonas spp. from goat and bovine raw milk. [Potencial proteolítico e lipolítico de espécies de Pseudomonas do leite cru caprino e bovino.] PesquisaVeterinária Brasileira 38(8):1577-1583. Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia para a Cadeia Produtiva do Leite, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Estadual de Londrina, Cx. Postal 11.011, Londrina, PR 86 057-970, Brazil. E-mail: ribeirojuniorjc@gmail.com Pseudomonas é o principal gênero de micro-organismos Gram negativos isolados do leite, são psicrotróficos, formadores de biofilmes e produtores de enzimas deteriorantes termodúricas. O objetivo do presente trabalho foi quantificar Pseudomonas spp. no leite de cabras e vacas produzido no estado do Paraná, Brasil, avaliar a atividade deteriorante em temperatura mesofílica e psicrotrófica e identificar, em nível de espécie, os isolados com potencial de produção de metaloprotease alcalina (gene aprX). Foram utilizados métodos microbiológicos, bioquímicos e moleculares para isolamento, confirmação e identificação dos isolados. As contagens médias foram de 1,6 (±6,3) x 104 e 0,9 (±3) x 102 UFC/mL para as amostras de leite caprino e bovino, respectivamente. Dos isolados de Pseudomonas do leite de cabra (n=60), 91,7% demonstraram potencial proteolítico quando incubadas a 35°C/48h e 80% a 7°C/10dias e lipolíticos em 95% dos isolados incubados em mesofilia e em 78,3% dos incubados em temperatura de refrigeração. Dos isolados do leite bovino (n=20), foi verificada atividade proteolítica de 35% apenas quando incubadas a 35°C/48h e lipolítica em 25% dos isolados incubados a 7°C/10d e 35°C/48h. Foi observado que 83,3% e 25% dos isolados confirmados geneticamente como Pseudomonas spp. do leite caprino e bovino, respectivamente, apresentaram o potencial de produção de metaloprotease alcalina, sendo as espécies P. azotoformans, P. koreensis, P. gessardii, P. monteilii e P. lurida as mais frequentes no leite de cabras e P. aeruginosa a única identificada do leite de vacas.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Picinin L.C.A., Toaldo I.M., Hoff R.B., Souza F.N., Leite M.O., Fonseca L.M., Diniz S.A., Silva M.X., Cerqueira M.M.O.P. & Bordignon-Luiz M.T. 2017. Survey of pyrethroid, macrocyclic lactone and antibacterial residues in bulk milk tank in Minas Gerais State, Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):97-104. Departamento de Ciência e Tecnologia de Alimentos, Universidade Federal de Santa Catarina, Rodovia Admar Gonzaga 1346, Bairro Itacorubi, Florianópolis, SC 88034-001, Brazil. E-mail: lidia.picinin@gmail.com A survey of veterinary drug residues in bulk milk tank from Minas Gerais State, Brazil, was carried out through a broad scope analysis. Here, 132 raw milk samples were collected at 45 dairy farms in Minas Gerais from August 2009 to February 2010, and analyzed for 42 analytes, comprising pyrethroids, macrocyclic lactones and antibacterials, using liquid chromatography coupled with mass spectrometry in tandem mode and gas chromatography with electron capture detection. Within all milk samples, at least one veterinary drug residue was identified in 40 milk samples (30.30%) by confirmatory tests, whereas 16 samples (12.12%) showed the presence of at least two residues. With regard to the Brazilian maximum residue levels, 11 milk samples (8.33%) were non-compliant according to Brazilian Legislation. The veterinary drugs detected in the non-compliant milk samples include penicillin V (one sample), abamectin (one sample) and cypermethrin (nine samples). Furthermore, the antibacterial screening methods failed to identify most of the positive samples that were detected by confirmatory tests, leading to a large discrepancy between the screening and confirmatory antimicrobial tests. Thus, the present study indicated that the veterinary drugs residues still represents a great concern for the milk production chain.

• Pesticide anthelmintic antibiotic raw milk pesticidas antelmínticos antibióticos leite cru

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Picinin L.C.A., Toaldo I.M., Hoff R.B., Souza F.N., Leite M.O., Fonseca L.M., Diniz S.A., Silva M.X., Cerqueira M.M.O.P. & Bordignon-Luiz M.T. 2017. Survey of pyrethroid, macrocyclic lactone and antibacterial residues in bulk milk tank in Minas Gerais State, Brazil. [Resíduos de piretróides, lactonas macrocíclicas e antimicrobianos em amostras de leite de tanque no estado de Minas Gerais.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):97-104. Departamento de Ciência e Tecnologia de Alimentos, Universidade Federal de Santa Catarina, Rodovia Admar Gonzaga 1346, Bairro Itacorubi, Florianópolis, SC 88034-001, Brazil. E-mail: lidia.picinin@gmail.com Avaliou-se a presença de 42 analitos, incluindo piretróides, lactonas macrocíclicas e antimicrobianos em 132 amostras de leite de tanque proveniente de 45 propriedades leiteiras localizadas no Estado de Minas Gerais. Para tal, utilizou-se a cromatografia líquida acoplada a espectrofotometria de massas tandem e cromatografia gasosa com detector com captura de elétrons. Dentre todas as amostras de leite, 40 (30,30%) amostras de leite de tanque apresentaram a presença de pelo menos um analito, enquanto 16 amostras (12,12%) de leite demonstraram a presença de pelo menos dois analitos. Considerando os limites estabelecidos pela legislação brasileira, 11 amostras de leite (8,33%) seriam consideradas como não conforme. Ademais, os testes de triagem para detecção de antimicrobianos no leite não conseguiram identificar a maioria das amostras positivas nos testes confirmatórios, levando a grande discrepância entre estes testes. Desta forma, os resultados do presente estudo indicam que os períodos de descarte do leite, especialmente para piretróides, não foram plenamente respeitados por todos os produtores de leite. Além disto, uma discrepância entre os resultados dos testes confirmatórios e os testes de triagem foi observada.